細胞劃痕實驗原理及步驟
一、細胞劃痕實驗原理
細胞劃痕實驗(Wound Healing)是一種操作簡單，經濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。這種方法的原理是，當細胞長到融合成單層狀態時，在融合的單層細胞上人為制造一個空白區域，稱為“劃痕”，劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區域使“劃痕”愈合，在一定程度上模擬了體內細胞遷移的過程，是研究細胞遷移的體外實驗中最簡單的方法。
二、細胞劃痕實驗步驟
1、細胞劃痕實驗所需材料：
6孔板(康寧，愛思進等國產或者進口品牌耗材均可)
marker筆
直尺
20微升槍頭(滅菌)
無血清培養基
PBS
2、細胞劃痕實驗具體步驟如下：
(1)準備工作：所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)
(2)先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻地劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
(3)在空中加入約5X105個細胞，具體數量因細胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。
(4)第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不要傾斜。
(5)用PBS洗細胞3次，去除劃下的細胞，加入無血清培養基。
(6)放入37℃5%CO2培養箱培養。按0、6、12、24小時取樣，拍照。
三、細胞劃痕實驗注意事項
1.劃痕法測量適用的細胞范圍較小，一般只適用于上皮細胞，纖維樣細胞。
2.雖然無血清培養可以忽略細胞增殖的影響，但是由于細胞內信號傳導系統整體性的下調節，細胞遷移的速度也會慢很多。
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關鍵詞：
細胞劃痕
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